CN101257929B包含龙胆酸的稳定的123-i放射性药物
用于稳定123-Ⅰ放射性药物的龙胆酸
发明领域
本发明涉及具有稳定剂的稳定化123I-标记的放射性药物组合物， 该稳定剂包含具有生物相容性阳离子的龙胆酸或其盐。
发明背景
已经公开龙胆酸作为稳定剂用于99mTc二膦酸放射性药物制备的 冻干试剂盒中[Tofe等，J.Nucl.Med.21，366-370(1980)]。US 4,233,284 和US 4,497,744公开了类似的主题。
US 5,384,113公开了龙胆酸、龙胆醇和水溶性盐、酯及其混合物 可用于防止111In、67Ga、169Yb、125I、123I或201Tl放射性标记的肽的自辐 解。US 5,384,113的实施例1至7涉及111In标记的肽，实施例9涉及186Re 标记的肽。实施例8描述123I标记的LH-RH(促黄体激素释放因子)的制 备。然而，实施例8不包含龙胆酸为用于123I-LH-RH的有效稳定剂的任 何证据。
US 6,315,979公开如下式所示的放射性碘代苯酚衍生物，该放射 性碘代苯酚衍生物用作肾功能显像放射性药物和用于近程放射疗法：
其中：m和n独立为0、1、2或3；
X为在生理pH时带负电荷或正电荷的基团；
R、R1、R2和R3独立为H或C1-4烷基；和
I*为123I、131I或125I。
US 6,315,979公开有可能用选自以下的各种稳定剂稳定放射性碘 代苯酚：苯甲醇、抗坏血酸、龙胆酸、半胱氨酸、丁基化羟基甲苯(BHT)、 柠檬酸、人血清白蛋白(HSA)、甘油、半胱胺、sulfarem、谷胱甘肽、 色氨酸和碘乙酰胺。没有具体公开龙胆酸稳定放射性碘代苯酚的用 途。
WO 02/04030公开了包含放射性标记的药物的药用组合物，用选 自以下的放射性同位素标记药物：99mTc、131I、125I、123I、117mSn、111In、 97Ru、203Pb、67Ga、68Ga、89Zr、90Y、177Lu、149Pm、153Sm、166Ho、32P、 211At、47Sc、109Pd、105Rh、186Re、188Re、60Cu、62Cu、64Cu和67Cu；用 下式的化合物或其药学上可接受的盐稳定药物：
其中E1为NH2或OH；A1、A2、A3、A4和A5各自独立为N、C(OH) 或CR1；条件是A1、A2、A3、A4和A5中的至少一个不为CH；各R1独立 为H、C(O)R2、C(O)OR2、NHC(＝O)NHR2、NHC(＝S)NHR2、OC(＝O)R2、 OC(＝O)OR2、S(O)2OR2、C(O)NR3R4、C(O)NR3OR4、C(O)NR2NR3R4、 NR3R4、NR3C(O)R4、PO(OR3)(OR4)、S(O)2NR3R4、S(O)2NR2NR3R4、 S(O)2NR3OR4、0-5R5取代的C1-C10烷基、0-5R5取代的C3-C10环烷基、 0-5R5取代的C2-C10烯基或0-5R5取代的芳基；R2、R3和R4各自独立为H、 C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C6烯基、苄基或苯基；或R3和R4一起形 成C3-C10环烷基或C3-C10环烯基，任选插入O、S、NH、S(＝O)、S(O)2、 P(＝O)(OH)、C(＝O)NH、NHC(＝O)、NH(C＝O)NH或NH(C＝S)NH；各 R5独立为H、NH2、OH、CO2H、C(＝O)NH2、C(＝O)NHOH、C(＝O)NHNH2、 NH(C＝NH)NH2、NH(C＝O)NH2、NH(C＝S)NH2、PO3H2、SO3H或 S(O)2NH2。
WO 02/04030似乎没有定义A6。术语″非肽″广泛定义为骨架含有 少于3个酰胺键或少于3个氨基酸的化合物。该说明书声明，稳定剂优 选不为龙胆酸。没有具体公开龙胆酸作为稳定剂用于放射性碘放射性 药物的用途。
Mallinckrodt出售123I标记地间-碘苄基胍放射性药品[MIBG(I-123) 注射剂]，该间-碘苄基胍放射性药品包含浓度为约0.5mg/ml的龙胆酸。 该制剂的pH为4.0±0.5。
Eersels等[J.Lab.Comp.Radiopharm.，48，241-257(2005)]综述了 制备123I标记的放射性药物的方法。在第254页，他们提到，在高压灭 菌期间酸性条件(pH为3-4的缓冲液)使脱碘最小化是可行的，但对于一 些化合物也必须使用自由基清除剂以抑制脱碘。据说，由于它们的着 色，在高压灭菌期间经常省略经典的自由基清除剂例如抗坏血酸或龙 胆酸。据说在稳定特定的化合物(123I-R91150)防止辐解中，自由基清除 剂硫脲、N-乙酰基半胱氨酸和邻-碘马尿酸(OIH)给出满意的结果，但 其中只有OIH认为适用于人静脉注射的组合物(第254-55页)。
本发明
普遍接受的体外放射性碘放射性药物的脱碘化机制为水溶液中 显像剂的辐解。在水性介质中，放射性衰减引起与有机分子反应的高 活性氧类物质的形成。该活性类物质为自由基例如羟基或过氧化物自 由基，由水溶剂的分解产生。
123I的半衰期为13.2小时。市售的123I标记的放射性药物在最初的 生产之后需要时间以便质量控制、包装然后将药物分配至医院供患者 使用。分配和客户运送可能涉及空运，加上公路运输，因此在制备时 间点和使用时间点之间经过的时间可能为约24小时。这接近于123I的两 个半衰期。因此，考虑到由于放射性衰减的损耗，工业制备时的放射 性浓度(RAC)必须显著高于使用时间点。进一步考虑到对于成功的产 品，必需较大批量和/或较早地生产，因此必须使用更大量的放射性和 更高的RAC。这些因素表示辐解的风险显著增加。
在较低pH介质(pH为3或更小)中，123I放射性药物的脱碘速率可能 经常受到抑制，但在较高pH(特别是pH为7或以上)的介质中其脱碘更 快。然而，用于静脉注射的放射性药品必须在生物相容的pH时配制， 并且在注射时不会导致不适。因此，典型地在4.5至8.5的pH时配制这 样的产品，因此对于放射性药物，通过使用低pH的介质在较高RAC时 抑制脱碘是不可行的方案。在碱性pH时某些放射性药物也可能是化学 上不稳定的，例如在大于8的pH时酯基可水解。因此，需要适于静脉 注射的制剂pH的稳定化123I-放射性药物。
虽然先前已经使用龙胆酸作为99mTc放射性药物中的稳定剂，但已 经限制它在123I-标记的放射性药物中的使用，大概由于事实：
(a)当在溶液中静置时变色而产生棕色；
(b)当在溶液中加热(即当用于加热灭菌过程时)时变色而产生棕 色。
对于用来经静脉内给予患者的产品，显然很不希望这样的着色。
本发明提供龙胆酸稳定的123I放射性药物组合物，以及这样的组合 物的制备方法，该方法解决了这样的变色问题。
发明详述
在第一方面中，本发明提供稳定化放射性药物组合物，该放射性 药物组合物包含：
(i)用123I标记的合成化合物，当体内给药时，该合成化合物靶向哺 乳动物体内的部位；
(ii)包含龙胆酸或其盐的稳定剂，该龙胆酸或其盐具有稳定所述 123I-标记的合成化合物来防止辐解有效量的生物相容性阳离子；
(iii)含水生物相容性载体介质；
其中在介质中，123I的放射性浓度为8至1000MBq/cm3，生物相容 性载体介质的pH为4.5至8.5；
条件是当靶向哺乳动物体内部位的合成化合物为间-碘苄基胍 时，生物相容性载体介质的pH为5.0至8.5。
术语″合成″具有该术语通常的含义，即人造的、与从天然来源例 如从哺乳动物机体分离的相反。这样的化合物具有以下优点：可完全 控制它们的制备和杂质特征。
该放射性药物的分子量适当地为最高达5000道尔顿。优选，分子 量为150至3000道尔顿，最优选为200至1500道尔顿，特别优选为200 至500道尔顿。
该合成化合物在哺乳动物体内表现出生物靶向性质，其中将目标 部位的放射性碘化化合物吸收显像有助于提供有用的诊断信息。合适 的这样的药物包含血流显像剂例如123I-IMP或123I-HIPDM和肾功能显 像剂例如123I-OIH。优选，当给药至哺乳动物体内时，该合成化合物靶 向影响器官例如脑、心脏或肾功能的生物受体或转运蛋白。
最具辐解风险的合成的靶向化合物为靶向体内的生物受体、酶或 生物转运蛋白的那些化合物。这是因为，使用最少量的当前的非放射 性载体化合物，这样的靶向化合物通常最好，因为非放射性化合物也 是生物活性的，因此期望其与123I-放射性药物竞争体内的生物位点。 在这样的无载体加入或高比活性水平，并且由于RAC会相当高，辐解 风险增加。因此，本发明的稳定化组合物尤其可用于放射性药物，其 中合成的靶向化合物靶向体内的生物受体、酶或生物转运蛋白。这样 的生物靶实例包含多巴胺D-1和D-2受体；脑内的多巴胺转运蛋白；胆 碱能系统；5-羟色胺受体；苯并二氮杂受体；心肌的神经元系统； 心肌的代谢(β-氧化)和金属蛋白酶。
靶向脑多巴胺D-2受体的123I-标记的合成化合物的实例包含123I-依 匹必利和123I-IBZM，de Paulis[Curr.Pharm.Design，9，673-696(2003)] 描述了这些化合物。
如Morgan和Nowotnik[Drug News Perspect，12(3)，137-145(1999)] 所述，对于多巴胺转运蛋白，合适的药物包含123I-标记的托烷，优选 123I-CIT、123I-CIT-FP(DaTSCANTM)和AltropaneTM。
对于胆碱能系统，可用123I-标记的二苯羟乙酸奎宁环酯(QNB)获 得毒蕈碱乙酰胆碱系统的显像[Minoshima等，Semin.Nucl.Med.，34(1)， 70-82(2004)]。
对于5-羟色胺受体，合适的药物为123I-标记的5-HT(2A)受体拮抗 剂例如R91150[Eersels等，J.Lab.Comp.Radiopharm.，48，241-257 (2005)]。
对于苯并二氮杂受体，合适的药物为123I-碘西尼[Minoshima等， Semin.Nucl.Med.，34(1)，70-82(2004)]。
对于心肌的神经元系统，合适的药物为123I-MIBG[Wafelman等， Appl.Rad.Isot.，45(10)，997-1007(1994)和Kulkarni等，Semin.Nucl. Med.，20(2)，119-129(1990)]。对于心肌代谢显像，合适的药物包含脂 肪酸，优选BMIPP和IPPA[Corbett等，Semin.Nucl.Med.，29(3)，237-258 (1999)]。
当合成化合物包含苯甲酰胺时，优选的苯甲酰胺为IBZM。相应 的优选放射性药物为123I-IBZM：
123I-IBZM靶向体内的脑多巴胺D-2受体。Bobeldijk等[J.Lab. Comp.Radiopharm.，28，1247-1256(1990)]、Kung等[J.Nucl.Med.，32， 339-342(1991)]和Zea-Ponce等[Nucl.Med.Biol，26，661-665(1999)]描 述了123I-IBZM的合成。
合成化合物优选为非肽化合物。术语″非肽″指不包含任何肽键， 即两个氨基酸残基之间的酰胺键的化合物。
123I为碘的发射γ射线的放射性同位素，半衰期为13.2小时。123I优 选共价连接至合成化合物的苯基或乙烯基，因为碳原子为sp2杂化的 C-I键更稳定，因此在体外和体内都比含sp或sp3杂化碳原子的这样的键 较少倾向于代谢和脱碘。当123I-结合的苯基也用一个或多个″活化基团 ″官能化时，该化合物甚至更容易脱碘，因此本发明的稳定剂组合物尤 其有用。″活化基团″(Xa)的实例选自：-OH和-NH2。
术语″稳定剂″指通过捕获高活性的自由基例如水辐解产生的含氧 自由基，而抑制分解反应例如氧化还原反应过程的化合物。本发明的 稳定剂适当地选自具有生物相容性阳离子的龙胆酸(即2，5-二羟基苯甲 酸)及其盐：
龙胆酸
本发明的稳定剂以稳定123I-标记的合成化合物防止辐解有效的量 存在。这意味着稳定剂为首要的稳定化方法，当可存在其它稳定剂时， 龙胆酸稳定剂为主要的稳定化方法，即任何另外的稳定剂存在的量自 己不能有效的稳定。优选，龙胆酸稳定剂为放射性药物组合物中存在 的唯一稳定剂。龙胆酸稳定剂使用的合适浓度为0.02％至1.0％w/v，优 选为0.03％至0.4％，最优选为0.05％至0.2％，特别优选为0.1％。因为增 加龙胆酸的浓度将趋向于降低组合物的pH，所以在较高稳定剂浓度时 可能需要调整pH或使用缓冲液。
术语″生物相容性阳离子″指与离子化的、带负电荷的基团形成盐 的带正电荷的抗衡离子，其中所述带正电荷的抗衡离子也是无毒的， 因此适合给予哺乳动物机体，尤其是人体。合适的生物相容性阳离子 的实例包含：碱金属钠或钾；碱土金属钙和镁；和铵离子。优选生物 相容性阳离子为钠和钾，最优选为钠。本发明的优选稳定剂为龙胆酸 和龙胆酸钠，它们可单独使用或组合使用。
″生物相容性载体介质″为流体，尤其为液体，标记的合成化合物 混悬或溶解在其中，以使组合物为生理上耐受的，即可给予哺乳动物 机体而无毒性或过度不适。生物相容性载体介质适当地为可注射的载 液例如无菌、无热原的注射用水；水溶液例如生理盐水(可最好为平衡 液，以便最终注射用产品为等渗的或非低渗的)；一种或多种张力-调 节物质(例如血浆阳离子与生物相容性抗衡离子的盐)、糖(例如葡萄糖 或蔗糖)、糖醇(例如山梨糖醇或甘露醇)、二醇(例如甘油)或其他的非 离子多元醇物质(例如聚乙二醇、丙二醇等)的水溶液。生物相容性载 体介质也可包含生物相容的有机溶剂例如乙醇。这样的有机溶剂可用 来使更具亲脂性的化合物或制剂增溶。优选生物相容性载体介质为无 热原的注射用水、等渗盐水或乙醇水溶液。这样的乙醇水溶液可具有 一定范围的组成，但对于最终的组合物优选5-10％乙醇。如上所述， 用于静脉注射的生物相容性载体介质的pH适当地为4.0至10.5。对于本 发明的123I-标记的放射性药物，生物相容性载体介质的pH适当地为4.5 至8.5，优选为4.6至8.0，最优选为5.0至7.5。
当123I-标记的放射性药物为123I-IBZM时，生物相容性载体介质优 选为5-10％乙醇与其余百分数的缓冲水溶液的混合溶剂溶液。用于 123I-IBZM的最优选生物相容性载体介质为8％乙醇和92％缓冲水溶液。
介质中的123I的放射性浓度(RAC)适当地为8至1000MBq/cm3。优 选RAC为18至500MBq/cm3。RAC越高，辐解风险越大，因此本发明 的有效稳定剂越重要。在正常的实践中，生产时的RAC最高，并且放 射性衰减意味着当进行配制、试验、包装和分配至客户时RAC显著降 低。
用临床级注射器或容器合适的提供本发明的放射性药物组合物， 该注射器或容器装备有在维持灭菌完整性的同时适于用皮下注射针 单次或多次刺穿的密封(例如拧紧(crimped-on)的隔膜封盖)。这样的容 器可包含单剂量(″单位剂量″)或多患者剂量。合适的容器包含密封容 器，在允许通过注射器加入和抽取溶液的同时，该密封容器允许维持 灭菌完整性和/或放射性安全。优选的这样的容器为隔膜密封的瓶，其 中气密的盖用顶封(overseal)(典型为铝)拧紧。这样的容器的另外优点 为如果期望例如改变顶空气体或脱气溶液，该瓶盖可承受真空。
当用多剂量容器提供放射性药物时，优选这样的容器包含单体积 瓶(例如10至30cm3体积的瓶)，该瓶包含用于多个患者剂量的足够的放 射性药物。因此可在散装瓶制剂的有效期期间，在各个时间间隔将单 位患者剂量抽入临床级注射器以适应临床状况。
因此，设计包含单人剂量或″单位剂量″的放射性药物注射器优选 为一次性注射器或适于临床使用的其它注射器。这样的注射器可任选 装备注射器防护罩以保护操作人员免于放射性剂量。本领域已知合适 的这样的放射性药物注射器防护罩，可市购得到各种设计形式，优选 包含铅或钨。
放射性药物组合物可任选还包含另外的组分例如抗微生物防腐 剂、pH调节剂或填充剂。术语″抗微生物防腐剂″指抑制潜在地有害微 生物例如细菌、酵母或霉菌生长的试剂。抗微生物防腐剂也可表现出 一些杀菌性质，取决于剂量。本发明的抗微生物防腐剂的主要作用为 抑制放射性药物组合物中任何这样的微生物的生长。合适的抗微生物 防腐剂包含：对羟基苯甲酸酯，即对羟基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯或 丁酯或其混合物；苯甲醇；苯酚；苯甲酚；西曲溴铵和硫柳汞。优选 的抗微生物防腐剂为对羟基苯甲酸酯。
术语″pH调节剂″指可用于确保放射性药物组合物的pH在人或哺 乳动物给药的可接受限度(约pH 4.0至8.5)内的化合物或化合物的混合 物。合适的这样的pH调节剂包含药学上可接受的缓冲剂，例如曲辛、 磷酸盐缓冲剂或TRIS[即三(羟甲基)氨基甲烷]，和药学上可接受的碱 例如碳酸钠、碳酸氢钠或其混合物。对于123I-IBZM，优选的缓冲剂为 磷酸盐缓冲剂。
术语″填充剂″指在产品制备期间可便于原料处理的药学上可接受 的膨胀剂。合适的填充剂包含无机盐例如氯化钠，和水溶性糖或糖醇 例如蔗糖、麦芽糖、甘露醇或海藻糖。
可从许多供应商处市购得到龙胆酸及其盐例如龙胆酸钠。
可在灭菌的制备条件下制备本发明的放射性药物以给出期望的 灭菌的、无热原产品。也可在非灭菌条件下制备放射性药物，然后用 例如γ辐射；高压灭菌；干热；薄膜过滤(有时称无菌过滤)；或化学处 理(例如用环氧乙烷)进行最终灭菌。优选，如下面第三实施方案所述 制备本发明的放射性药物组合物。从前体适当地制备123I-标记的合成 化合物。″前体″适当地包含合成化合物的非放射性类似物，设计该类 似物的化学结构内含有元素(Y)，以便在Y上与123I放射性同位素的方便 化学形式发生化学反应，可以最少的步骤(理想地是单步)进行反应， 无需大量的纯化(理想地是没有进一步的纯化)以产生期望的放射性产 品。这样的前体为合成的，可以良好的化学纯度方便地得到。Bolton， J.Lab.Comp.Radiopharm.，45，485-528(2002)描述了合适的前体和它 们的制备。
123I源选自碘离子或碘鎓离子(I+)。最优选，化学形式为碘离子， 该碘离子在放射性合成期间典型地通过氧化剂转化成亲电性形式。
优选以除龙胆酸稳定剂之外的组合物提供前体。优选的前体为那 些前体，其中Y包含进行亲电性或亲核性碘化，或者与标记的醛或酮 进行缩合的衍生物。第一类实例为：
(a)有机金属衍生物例如三烷基锡烷(如三甲基锡烷基或三丁基锡 烷基)或三烷基硅烷(如三甲基甲硅烷基)；
(b)朝亲电性卤化活化的芳环(例如苯酚)和朝亲核性卤化活化的 芳环(例如芳基碘鎓、芳基重氮盐、硝基芳基)。
Y适当地包含：非放射性前体卤素原子例如芳基碘离子或溴离子 (以允许放射性碘交换)；活化的前体芳环(例如苯酚基团)；有机金属前 体化合物(例如三烷基锡或三烷基甲硅烷基)；或有机前体例如三氮烯 或用于亲核取代的好的离去基团例如碘鎓盐。Bolton[J.Lab.Comp. Radiopharm.，45，485-528(2002)]描述了引入123I的方法。以下给出可连 接放射性碘的合适的前体芳基(Y)的实例：
两者都包含取代基，该取代基容易允许放射性碘取代到芳环上。可通 过直接碘化，例如通过放射性卤素交换合成含放射性碘的备选取代 基：
″前体″可任选共价连接至固体载体基质。这样，在溶液中形成期 望的放射性药物，而起始原料和杂质仍然结合于固相上。因此可使用 包含柱体的试剂盒，该柱体可插入适当调节的自动合成器中。除了固 体载体-结合的前体，该柱体可包含柱以去除不需要的放射性碘离子； 和合适的容器，连接该容器以便允许反应混合物蒸发和允许按照需要 配制产物。也可包含试剂和溶剂以及合成所需要的其它消耗品，还有 运载软件的压缩盘，该软件允许合成器以满足客户对于放射性浓度、 体积、释放时间等要求的方式运行。该试剂盒的所有组件方便地是一 次性的，以便使运行之间污染的可能性最小化，并将保证灭菌和质量。
在第二方面中，本发明提供灭菌的稳定剂储液，该储液在已去除 氧气的环境中，在生物相容性载体介质中包含第一实施方案的龙胆酸 稳定剂。
″生物相容性载体介质″加上其优选方面如第一实施方案所描述。
短语″已去除氧气的环境″指已经采取合适的步骤将氧水平保持在 绝对最小值：
(a)当稳定剂在溶液中时，已从溶液中置换出氧气，并采取步骤以 保证维持溶液上的顶空气体不含氧。这是因为，环境包含溶液本身和 溶液与之接触的气氛。
(b)当制备稳定剂溶液时，使用不含氧的溶液和反应容器；
(c)当稳定剂为固态时，在固体周围维持不含氧的气氛。
可通过本领域已知的各种方法去除氧气，例如延长化学惰性气体 对生物相容性载体溶液的吹扫以便置换任何溶解的氧；用化学惰性气 体对生物相容性载体溶液冷冻-解冻脱气，或在使用这样的惰性气体气 氛中冷冻干燥。
本发明发明人相信，对于先有技术使用的龙胆酸稳定剂有时观察 到棕色的问题，起因于龙胆酸氧化形成的醌氢醌复合物[T.J.Holmes 等，J.Org.Chem.，49，4736-4738(1984)]。
术语″化学惰性气体″指如本领域已知，将用于化学提供″惰性气氛 ″的气体。这样的气体不易进行氧化反应或还原反应(例如分别与氧和 氢反应)，或与有机化合物的其它化学反应(例如与氯反应)，因此这样 的气体与许多合成化合物相容而不与该合成化合物反应，甚至与该气 体接触时延期贮存许多小时或甚至数周。合适的这样的气体包含氮气 或惰性气体例如氦气或氩气。优选化学惰性气体为氮气或氩气。最优 选，化学惰性气体比空气重，在稳定剂组合物上维持覆盖。因此，优 选的化学惰性气体为氩气。为了保证不发生氧气进入去氧化的溶液 中，稳定剂上面的顶空气体维持在惰性气体的正压下，或者稳定剂保 持在气密性容器中(如上所述)，其顶空气体为化学惰性气体。可市购 得到药用级化学惰性气体。
用于稳定剂储液的优选生物相容性载体介质包含水溶液，该水溶 液的pH适用于静脉给药。优选这样的水溶液为缓冲溶液，最优选为磷 酸盐缓冲液。当放射性药物为123I-IBZM时，缓冲储液的pH适当地为pH 5至8，优选为5.4至7，最优选为5.7至6.3。如上所述，龙胆酸溶液趋向 于遭受变色问题。现在已发现，只要采取合适的步骤使环境中存在的 氧气最小化，可制备在缓冲水溶液中的无菌龙胆酸溶液，该龙胆酸溶 液甚至在贮存一年以上不变色。可在非灭菌条件下制备储液，然后用 例如γ辐射、高压灭菌、干热或化学处理(例如用环氧乙烷)进行最终灭 菌。或者，可在无菌的制备条件下制备储液以给出期望的灭菌、无热 原产品。优选通过最终灭菌制备灭菌的储液，最优选通过高压灭菌。 这样的高压灭菌涉及在超过121℃时蒸汽加热，因此表示其中可能期 望不需要的化学反应的压力条件。备选的稳定剂抗坏血酸不能承受缓 冲溶液中的这样的加热灭菌。因此，令人惊奇的是在这样的条件下可 维持龙胆酸不变色。相反，如果不排除氧气，龙胆酸溶液受到高压灭 菌，发生明显的变色，产生棕色溶液，静置后进一步变黑。
如以上放射性药物所述，储液用于合适的密封容器中。因此不含 氧的介质中的龙胆酸储液是用于123I-标记的放射性药物的更有用和更 广泛适用的稳定剂，因为它可以使用而无变色问题。因此，本发明的 灭菌稳定剂溶液为无色或几乎无色的，因为它们缺少龙胆酸的氧化产 物，特别是醌氢醌。在制备之后，优选将龙胆酸储液贮存在2至8℃的 黑暗中，因为这些预防措施也有助于防止变色。
该非放射性储液具有以下优点：可预先制备、测定和质量控制， 并保持为灭菌状态，以便它可在不同时间和/或日期用于不同批次的 123I-放射性药物制备。这节省每一批次运行的制备时间，这点是重要 的，因为所讨论产品的半衰期为13.2小时。可通过标准方法，例如HPLC 测定储液中龙胆酸的浓度。
在第三方面中，本发明提供第一实施方案的稳定化放射性药物组 合物的制备方法，该方法包括将以下的无菌溶液混合：
(i)第一实施方案的123I-标记合成化合物在生物相容性载体介质中 的溶液；
(ii)第二实施方案的龙胆酸储液等分试样；其中在所得混合介质 中，123I放射性药品的放射性浓度为8至1000MBq/cm3，在所得放射性 药物组合物中，生物相容性载体介质的pH为4.5至8.5。
用于(i)和(ii)的″生物相容性载体介质″可相同或不同，如第一和第 二实施方案(上面)所描述，包含其优选的方面。因此，在步骤(i)中， 介质可为100％乙醇，在步骤(ii)中用缓冲水溶液稀释得到最终的乙醇 缓冲水溶液组合物。当放射性药物为123I-IBZM时，溶液(i)的溶剂优选 为乙醇，溶液(ii)的溶剂优选为磷酸盐缓冲液，最终组合物的乙醇含量 为5-10％。稳定剂的优选实施方案如上面第一实施方案所描述。稳定 剂储液(ii)的其它方面，包括稳定剂的合适浓度如第二实施方案所描 述。
应注意，在与龙胆酸稳定剂的混合发生之前，已适当地制备123I- 标记的合成化合物，并优选纯化去除杂质(例如过量的反应物)。这是 因为，从作为放射性同位素源的碘化物中引入123I的方法几乎总是涉及 氧化剂的使用。龙胆酸为还原剂，因此将干扰放射性标记，或甚至可 能产生不期望的氧化还原反应产物和变色。
因为123I-标记的合成化合物在缺少稳定剂的溶液中的时间越长， 辐解的风险越大，因此，稳定剂的引入时间应使在123I-标记化合物的 制备之后尽可能快地进行混合。如果123I-标记化合物已经被纯化和已 经溶于生物相容性溶剂(例如乙醇)，那么这点可能几乎不是决定性的， 因为期望100％有机溶剂介质中的纯化化合物相对稳定。
优选在已排除氧气的环境中提供稳定剂溶液[溶液(ii)]。在上面的 第二实施方案中描述了排除氧气的方法。也可任选将溶液(i)和放射性 药品维持于已排除氧气的环境中，但这只对溶液(ii)真正地重要。
在第四方面中，本发明提供具有生物相容性阳离子的龙胆酸或其 盐作为稳定剂，使在第一实施方案中所定义的123I-标记的合成化合物 在含水生物相容性载体介质中的溶液稳定防止辐解的用途，其中在介 质中，123I的放射性浓度为8至1000MBq/cm3，所述生物相容性载体介 质的pH为4.5至8.5。
稳定剂、合成化合物和生物相容性载体介质的优选方面如第一实 施方案(上面)所描述。
作为放射性药物，对于为适合人给药的形式，即如上所述灭菌形 式的水溶液，该用途尤其有价值。
通过下面详述的非限定性实施例来阐述本发明。用抗坏血酸稳定 化的123I-IBZM购自荷兰GE Healthcare公司。实施例1比较123I-IBZM用 龙胆酸和先有技术稳定剂抗坏血酸的稳定化。其显示：当使用龙胆酸 时，放射性药物制备中的主要放射性化学杂质(即游离123I-碘化物)几乎 减半，从约4-5％减到2-3％。而123I-碘化物不能穿过血脑屏障，该改进 降低了给予患者的放射性化学杂质水平。
实施例2显示：在0.06％至0.34％w/v的浓度范围内，龙胆酸为有 效的稳定剂，并且在0.13％至0.34％w/v范围内具有很相似的结果。实 施例3显示：在121℃下的高压灭菌(即蒸汽)灭菌步骤灭菌的龙胆酸储 液仍然是123I-IBZM的有效稳定剂。实施例4和图1显示：对于123I-IBZM 的稳定化，有一个龙胆酸稳定剂的浓度，高于该浓度几乎得不到或得 不到另外的稳定化益处。实施例5显示：龙胆酸稳定123I-MIBG也是有 效的，并且在比苯甲醇低很多的浓度下也有效。
实施例1：龙胆酸(GA)对比抗坏血酸(AA)稳定123I-IBZM
通过Bobeldijk等的方法[J.Lab.Comp.Radiopharm.，28，1247-1256 (1990)]制备123I-IBZM。制备小量系列123I-IBZM溶液：将200μl的 123I-IBZM乙醇溶液(925MBq/cm3)加入至各瓶中，然后加入2.3ml的任 选含稳定剂的磷酸盐缓冲水溶液，通过这样的方式，得到的乙醇含量 为8％，校准时间(calibration time)的放射性浓度为74MBq/cm3(2 mCi/ml)。
在室温下贮存瓶，在用磷酸盐缓冲液稀释时和之后24小时和48小 时，通过薄层色谱法(TLC)测定放射性化学纯度(RCP)。结果见表1所 示：
表1：用AA和GA稳定123I-IBZM
其中：AA＝抗坏血酸 GA＝龙胆酸.
*)在一批之内的随机瓶中测定制备当天(EOS)的RCP，并假定其为 代表性的。已经表明，各组合物之间EOS时的RCP没有显著不同。
实施例2：龙胆酸的浓度对稳定123I-IBZM的影响
按照实施例1制备123I IBZM的乙醇溶液。制备小量系列123I-IBZM 溶液：将120μl的123I-IBZM乙醇溶液(925MBq/cm3)加入至各瓶，然后 加入1.38ml的含稳定剂的磷酸盐缓冲水溶液，通过这样的方式，得到 的乙醇含量为8％，校准时间的放射性浓度为74MBq/cm3(2mCi/ml)。 在室温下贮存瓶，在用磷酸盐缓冲液稀释之后的24小时和46小时测定 RCP。结果见表2所示：
表2：GA浓度对123I-IBZM稳定化的影响
其中：AA＝抗坏血酸 GA＝龙胆酸
$AA的储液未灭菌。
实施例3：灭菌储液对用龙胆酸稳定123I-IBZM的影响
制备所示的稳定剂储液，用氩气吹扫，然后在氩气下密封于带 TeflonTM涂覆橡胶塞的隔膜密封的瓶中。
在121℃下通过高压灭菌将溶液灭菌15分钟，然后在使用前允许 其冷却至室温。
制备小量系列123I-IBZM溶液：将123I-IBZM的乙醇溶液(925 MBq/cm3)加入至各瓶，然后加入含表3(下面)指定稳定剂的磷酸盐缓 冲水溶液，通过这样的方式，得到的乙醇含量为8％，校准时间的放射 性浓度为74MBq/cm3(2mCi/ml)。在制备之后3小时和在室温下贮存51 小时之后测定各瓶的RCP。
表3：
其中：AA＝抗坏血酸 GA＝龙胆酸
实施例4：储液中龙胆酸浓度对稳定123I-IBZM的影响
步骤(a)：龙胆酸溶液
将磷酸盐缓冲液(300ml)分成6瓶，每瓶50ml，含有各种量的龙胆 酸，对应于0％、0.024％、0.050％、0.10％、0.20％和0.39％的w/v浓度。 检查pH，如有必要通过加入NaOH调节获得5.8(±0.1)的pH。用TeflonTM 涂覆橡胶塞将瓶塞住，在121℃下灭菌15分钟。
步骤(b)：123I-IBZM溶液。
将123I-IBZM的乙醇溶液(REF时的放射性浓度：925MBq/ml(25 mCi/ml))分成6瓶，将步骤(a)的6份龙胆酸缓冲溶液等分试样加入至各 瓶中获得最终溶液，该最终溶液的总放射性含量为185MBq(5mCi)， RAC为74MBq/ml(2mCi/ml)，乙醇含量为8％。用TeflonTM涂覆橡胶塞 将瓶塞住，在室温下贮存。在EOS之后的各个时间点测量RCP。代表 性的结果见图1所示。
实施例5：磷酸盐缓冲液中龙胆酸对123I-mIBG的稳定化效果
制备两个系列的5瓶123I-mIBG溶液：将0.5cm3用磷酸盐缓冲液 (360MBq/ml3)新制备的123I-mIBG(不含稳定剂)溶液等分试样加入至 各瓶中，然后加入2.0cm3的包含表4(下面)指定稳定剂的磷酸盐缓冲水 溶液等分试样，然后混合。最终的混合物不加热灭菌。每瓶的总活性 为185MBq，RAC为74MBq/ml。比活性为992GBq/g mIBG碱(base)。 将瓶A1至E1贮存在40℃下，瓶A2至E2贮存在20℃下。在EOS(合成结 束)时和此后的3、20和45小时测定RCP。结果见表5所示：
表4：磷酸盐缓冲液(pH 6)
缓冲液 稳定剂浓度 A 1％苯甲醇 B 无稳定剂 C 0.03％GA D 0.06％GA E 0.13％GA
表5：用苯甲醇和龙胆酸稳定123I-MIBG